¡Hola! Como proveedor de estaciones de trabajo manuales de PCR o QPCR, estoy entusiasmado de compartir algunas de las mejores prácticas para usar estos dispositivos ingeniosos. Ya sea que sea un novato en el laboratorio o en un profesional experimentado, estos consejos pueden ayudarlo a aprovechar al máximo su estación de trabajo y garantizar resultados precisos cada vez.
Configuración de su estación de trabajo
Lo primero es lo primero, encontrar el lugar correcto para su estación de trabajo manual de PCR o QPCR es crucial. Desea colocarlo en un ambiente limpio y estable. Evite áreas con mucho tráfico peatonal o dónde podría ser golpeado. Un banco de laboratorio dedicado que está nivelado y libre de vibraciones es ideal. Asegúrese de que haya suficiente espacio alrededor de la estación de trabajo para que pueda moverse cómodamente y acceder a todos los controles y componentes.
Antes de comenzar a usar la estación de trabajo, dale un buen lugar una vez, más. Verifique cualquier daño visible a las piezas, como los pipetas o las bandejas de muestra. Asegúrese de que todos los cables estén conectados correctamente y no haya cabos sueltos. Si está utilizando accesorios adicionales, como un escáner de código de barras o una unidad de control de temperatura, verifique que también estén configurados correctamente.
Preparando sus muestras
La preparación de la muestra es un paso clave. Comience organizando sus muestras de manera lógica. Etiquete sus tubos o placas claramente con el nombre de la muestra, ID y cualquier otra información relevante. Esto le ahorrará un montón de tiempo y evitará la mezcla: UPS más adelante.
Al pipear sus muestras, use pipetas de alta calidad. Calibrarlos regularmente para garantizar mediciones de volumen precisas. No desea terminar con resultados inconsistentes porque su pipeta está apagada. Y recuerde cambiar las puntas de pipeta entre cada muestra para evitar la contaminación cruzada.
Para PCR o QPCR, deberá preparar sus mezclas de reacción cuidadosamente. Siga el protocolo con precisión, agregando las cantidades correctas de cebadores, sondas, enzimas y tampones. Mantenga todo en el hielo hasta que esté listo para cargarlo en la estación de trabajo. Esto ayuda a mantener la integridad de sus reactivos.
Cargando tus muestras
Una vez que sus muestras estén listas, es hora de cargarlas en la estación de trabajo manual de PCR o QPCR. La mayoría de las estaciones de trabajo tienen un diseño específico para bandejas de muestra y depósitos de reactivos. Asegúrese de colocar sus muestras y reactivos en las posiciones correctas de acuerdo con las instrucciones.
Al cargar las muestras, sea suave. Evite salpicar o derramar el líquido. Puede usar una técnica de pipeteo lenta y estable para garantizar una dispensación precisa. Si está trabajando con una gran cantidad de muestras, podría ser una buena idea cargarlas en lotes para evitar cualquier error.
Ejecutando el programa PCR o QPCR
Después de cargar sus muestras, es hora de configurar el programa PCR o QPCR. La mayoría de las estaciones de trabajo vienen con protocolos previamente programados, pero es posible que deba personalizarlos según su experimento específico. Preste mucha atención a la configuración de temperatura, el número de ciclos y la duración de cada paso.
Antes de comenzar la ejecución, doble: verifique toda la configuración. Es una buena idea que alguien más lo revise también, solo para estar más seguro. Una vez que esté seguro de que todo está configurado correctamente, presione el botón de inicio y deje que la estación de trabajo haga lo suyo.
Monitoreo de la ejecución
Mientras que la PCR o la ejecución de QPCR están en progreso, es importante vigilar la estación de trabajo. Verifique la pantalla de temperatura regularmente para asegurarse de que esté dentro del rango esperado. Algunas estaciones de trabajo también tienen alarmas que se dispararán si hay un problema, como una desviación de temperatura o una falla mecánica.
Si nota algún problema durante la ejecución, no se asuste. Detenga la ejecución de inmediato y resuelva el problema del problema. Podría ser algo tan simple como un cable suelto o una punta de pipeta obstruida. Solucione el problema y luego reinicie la ejecución si es necesario.
Analizar los resultados
Una vez que se completa la ejecución, es hora de analizar sus resultados. La mayoría de las estaciones de trabajo manuales de PCR o QPCR vienen con software que puede ayudarlo a interpretar los datos. El software puede generar gráficos, calcular los valores de CT y proporcionar otra información útil.
Al analizar los resultados, busque cualquier signo de contaminación o error. Verifique las curvas de amplificación consistentes y asegúrese de que los valores de CT estén dentro del rango esperado. Si tiene alguna duda sobre los resultados, es posible que desee repetir el experimento o ejecutar controles adicionales.
Limpieza y mantenimiento
Después de cada uso, es importante limpiar su estación de trabajo manual de PCR o QPCR correctamente. Comience eliminando las muestras o reactivos restantes de las bandejas y depósitos. Use un detergente suave y un paño suave para limpiar las superficies de la estación de trabajo. Asegúrese de limpiar todos los rincones y grietas donde podrían acumularse la suciedad o los escombros.
El mantenimiento regular también es esencial para mantener su estación de trabajo en las mejores condiciones. Siga las recomendaciones del fabricante para piezas móviles lubricantes, reemplazando filtros y calibrantes sensores. Al cuidar bien su estación de trabajo, puede extender su vida útil y garantizar un rendimiento confiable.
Otras consideraciones
Cuando se trata de elegir la estación de trabajo adecuada para sus necesidades, ofrecemos una gran variedad de opciones. Por ejemplo, elPRCXI Pipetting WorkstationEs una opción fantástica si está buscando una solución enfocada. Y si también estás involucrado en los ensayos de ELISA, nuestroEstación de trabajo manual de ELISAPuede ser una gran adición a su laboratorio. Por supuesto, nuestroEstación de trabajo manual de PCR o QPCRestá específicamente diseñado para satisfacer las necesidades de los experimentos PCR y QPCR.
Si está interesado en aprender más sobre nuestros productos o tiene alguna pregunta sobre el uso de una estación de trabajo manual de PCR o QPCR, nos encantaría saber de usted. Contáctenos para comenzar una conversación sobre sus necesidades de adquisición. Estamos aquí para ayudarlo a encontrar la mejor solución para su laboratorio.
Referencias
- Brown, TA (2010).Clonación de genes y análisis de ADN: una introducción. Wiley - Blackwell.
- Sambrook, J. y Russell, DW (2001).Clonación molecular: un manual de laboratorio. Cold Spring Harbor Laboratory Press.